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      Total Glutathione Quantification Kit
化学名
製品コード T419

 容 量
    税込価格
本体価格
100
tests
\32,940
 
\30,500
【キット内容】
[100tests]
・Substrate(DTNB)     ×2
・Enzyme Solution   50μl ×1
・Coenzyme          ×2
・Buffer Solution    50 ml ×1
・Standard GSH        ×1
 
 
 


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取扱説明書

 性 質
    グルタチオン(γ-L-glutamyl-L-cysteinylglycine)は生体内に存在するトリペプチドで、glutathione peroxidase、glutathione S-transferaseおよびthiol transferase等の酵素基質として関与している。またグルタチオンは酸素ラジカル捕捉能があり、アスコルビン酸と同様の抗酸化作用が認められている。
     グルタチオンは、次に示した酵素リサイクリング法によって高感度に検出される。
     5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid) (DTNB)はジスルフィドを分子内に含有し、グルタチオンを酸化すると同時に自身は5-Mercapto-2-nitrobenzoic acidに還元される。このチオールの吸光度(λmax=412 nm)よりグルタチオンを定することができる。
     Total Glutathione Quantification Kitはこの酵素リサイクリング法を利用した96穴マイクロプレート用キットである。短時間(30分以内)で、高感度にtotal glutathioneを定することが可能である。
     酸化型グルタチオン(GSSG)、還元型グルタチオン(GSH)の分別定量を行いたい場合には、GSSG/GSH Quantification Kit(Code: G257)をご使用いただきたい。


     長
    1) 高感度にtotal glutathioneを定できる。
     (検出範囲:6.25〜100 μmol/l)
    2) 一度に多検体の測定が可能である。

    注意事項
    キット開封後、各溶液の保存方法・保存期間は下記の通りである。
    ・Coenzyme working solution
      純水で溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる
    ・Substrate working solution
      溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
    ・GSH standard solution
      溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
    ・Enzyme working solution
      希釈後、4℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
    <キット以外に必要なもの>

    ・20 μl, 200 μlマルチチャンネルピペット ・インキュベーター ・プレートリーダー(405 nmあるいは415 nmフィルター)
    ・96穴マイクロプレート ・5-スルホサリチル酸(SSA)


    測定原理





           
    リン酸緩衝液(pH7.5)中の5-Mercapto-2-nitrobenzoic acidの吸収スペクトル


    操作方法


よくあるご質問 
SSAは何のため?
グルタチオン以外の酸化ストレスマーカー
サンプルの希釈方法
測定時のタイムラグ対策
妨害物質
 
参考文献
    1) O. W. Griffith,"Determination of Glutathione and Glutathione Disulfide Using Glutathione Reductase and 2-Vinylpyridine", Anal. Biochem., 1980, 106, 207.
    2) M. E. Anderson, "Determination of Glutathione and Glutathione Disulfide in Biological Samples", Methods in Enzymol., 1985, 113, 548.
    3) M. A. Baker, G. J. Cerniglia and A. Zaman, "Microtiter Plate Assay for the Measurement of Glutathione and Glutathione Disulfide in Large Numbers of Biological Samples", Anal. Biochem., 1990, 190, 360.
    4) C. Vandeputte, I. Guizon, I. Genestie-Denis, B. Vannier and G. Lorenzon, "A Micrototer Plate Assay for Total Glutathione and Glutathione Disulfide Contents in Cultured/isolated Cells: Performance Study of a New Miniaturized Protocol", Cell Biol. Toxicol., 1994, 10, 415.
    5) S. A. McGrath-Morrow and J. Stahl,"Inhibition of Glutamine Synthetase in A549 Cells During Hyperoxia", Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 2002, 27, 99.
    6) T. Sato, K. Seyama, Y. Sato, H. Mori, S. Souma, T. Akiyoshi, Y. Kodama, T. Mori, S. Goto, K. Takahashi, Y. Fukuchi, N. Maruyama and A. Ishigami, "Senescence Marker Protein-30 Protects Mice Lungs from Oxidative Stress, Aging, and Smoking", Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2006, 174, 530.
    7) M. L. Mulhern, C. J. Madson, A. Danford, K. Ikesugi, P. F. Kador and T. Shinohara, "The Unfolded Protein Response in Lens Epithelial Cells from Galactosemic Rat Lenses", Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 2006, 47(9), 3951.
 
取扱注意
1.保存方法:冷蔵
 
危険・有害性シンボルマーク(GHS表示)
 
 
備 考
(開発元:Dojindo Molecular Technologies, Inc.) 
 
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