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      -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-
化学名
製品コード DK02

 容 量
    税込価格
本体価格
20
samples
\80,136
 
\74,200
【キット内容】 
[20 samples]
・ARP-DNA Standard Solution         各 250μl × 1
(0, 2.5, 5.0, 10, 20, 40 AP sites/100,000 bp)  
・ARP Solution                    250μl × 1
・DNA Binding Solution                10 ml × 1
・Washing Buffer                       × 1
・HRP-Streptavidin                  25μl × 1
・TE Buffer                       40 ml × 1
・Substrate Solution                 10 ml × 1
・Filtration Tube                     20 tubes
・96-well Microplate/U Bottom              × 1
 
 
 


ダウンロード

取扱説明書

プロトコル

 性 質
    生物の遺伝情報を保持しているDNAは、複製時のDNA polymeraseのエラーに加えて、環境中の放射線や紫外線、またはアルキル化剤等の化学物質、生体内における活性酸素等の代謝産物により損傷を受ける。これらのエラーや損傷が正しく修復されなければ突然変異を誘発し、これが癌や老化の原因となる。
     DNA損傷部位には修復機構が働き、その一つとして塩基除去修復がある。この時AP site (apurinic / apyrimidinic site)と呼ばれる塩基除去部位が出現する。つまりAP siteの検出はDNA損傷部位を測定し得る有効な方法となる。
     ARP(N'-Aminooxymethylcarbonylhydrazino-D-biotin)はこのAP siteと特異的に結合しビオチン化できる試薬として知られている。-Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-は、ARPを用いてDNAをビオチン化し96穴マイクロプレートに固定化して検体DNA中のAP siteを簡便に定できるキットである。
     このキットには、AP site数が既定された標準DNAが含まれており、HRP標識ストレプトアビジンによるビオチン検出法を用いることによってAP siteの定ができる。

    使用方法は、プロトコルをご覧下さい。

    冷蔵保存中もしくは室温に戻した際に、フィルトレーションチューブに水滴様の液粒が見られることがあります。
      これはメンブランの乾燥防止剤が液粒化したもので、製品の性能に問題はございません。
    *本キットには溶液の入ったマイクロチューブのコンポーネントが含まれています。
     チューブ内壁やキャップに溶液が付着していることがありますので、開封前に振り落としてご使用ください。
    <キット以外に必要なもの>

    ・10 μl, 200μl, 1 mlマイクロピペッター(可変式) ・200 μl 8連マイクロピペッター(可変式) ・インキュベーター(37℃)
    ・マイクロプレートリーダー ・0.5 ml, 1.5 ml遠心チューブ ・遠心機 ・DNA精製キット※  ・ペーパータオル

    ※小社では、各種DNA精製キットを販売しております。
    Get pureDNA Kit-Cell, Tissue(Code:GK03))
    DNA精製に関するご質問は、カスタマーリレーション部までお問い合わせください。



    測定原理






    ARP-DNA Standard solutionを用いて作成した検量線


    操作方法


よくあるご質問 
40AP sites/100,000以上は作成できるか?
AP Site以外の酸化ストレスマーカー
DNAの精度はどのくらいが必要?
DNAをARP化せずに保存できるか?
このキットで何が測定出来るか?
測定できる検体数は?
溶液の廃棄方法を教えて下さい。
 
参考文献
    1) A. Sancar and G. B. Sancar, "DNA Repair Enzymes", Annu. Rev. Biochem., 1988, 57, 29.
    2) T. Lindahl and B. Nyberg, "Rate of Depurination of Native Deoxyribonucleic Acid",
    Biochemistry, 1972, 11, 3610.
    3) M. Liuzzi and M. Talpaert-Borle, "A New Approach to the Study of the Base-excision Repair Pathway Using Methoxyamine",
    J. Biol. Chem., 1985, 260, 5252.
    4) M. Weinfeld, M. Liuzzi and M. C. Paterson, "Response of Phage T4 Polynucleotide Kinase Toward Dinucleotides Containing Apurinic Sites: Design of a 32P-postlabeling Assay for Apurinic Sites in DNA",
    Biochemistry, 1990, 29, 1737.
    5) B. X. Chen, K. Kubo, H. Ide, B. F. Erlanger, S. S. Wallace and Y. W. Kow, "Properties of a Monoclonal Antibody for the Detection of Abasic Sites, a Common DNA Lesion",
    Mutat. Res., 1992, 273, 253.
    6) J. A. Gralnick and D. M. Downs, "The YggX Protein of Salmonella enterica Is Involoved in Fe(II) Trafficking and Minimizes the DNA Damage Cause by Hydroxyl Radicals:Residue CYS-7 is Essential for YggX Function", J. Biol. Chem., 2003, 278, 20708.
    7) J. W. Pippin, R. Durvasula, A. Petermann, K. Hiromura, W. G. Couser and S. J. Shankland, "DNA Damage is a Novel Response to Sublytic Complement C5b-9 Induced Injury in Podocytes", J. Clin. Invest., 2003, 111, 877.
    8) S. Watanabe, T. Ichimura, N. Fujita, S. Tsuruzono, I. Ohki, M. Shirakawa, M. Kawasuji and M. Nakao, "Methylated DNA-binding Domain 1 and Methylpurine DNA Glycosylase Link Transcriptional Repression and DNA Repair in Chromatin", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2003, 100, 12859.
    9) M. Endres, M. Ahmadi, I. Kruman, D. Biniszkiewicz, A. Meisel and K. Gertz, "Folate Deficiency Increases Postischemic Brain Injury", Stroke, 2005, 36, 321.
    10) J.-M. Li, M. Mogi, K. Tsukuda, H. Tomochika, J. Iwanami, L.-J. Min, C. Nahmias, M. Iwai and M. Horiuchi, "Angiotensin II-Induced Neural Differentiation via Angiotensin II Type 2 (AT2) Receptor-MMS2 Cascade Involving Interaction between AT2 Receptor-Interacting Protein and Src Homology 2 Domain-Containing Protein-Tyrosine Phosphatase 1", Mol. Endocrinolo., 2007, 21(2):499.
    11) D. R. McNeill and D. M. Wilson III, "A Dominant-Negative Form of the Major Human Abasic Endonuclease Enhances Cellular Sensitivity to Laboratory and Clinical DNA-Damaging Agents", Mol. Cancer Res., 2007, 5(1), 61.
 
取扱注意
1.保存方法:冷蔵
 
危険・有害性シンボルマーク(GHS表示)
 

感嘆符
 






 
備 考
(開発元:Dojindo Molecular Technologies, Inc.) 
 
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