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      Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)
化学名 Monoclonal anti-nitroguanosine antibody
製品コード AB02

 容 量
    税込価格
本体価格
50
μg
\72,360
 
\67,000


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プロトコル

 性 質
8−ニトログアノシンは、一酸化窒素(NO)とスーパーオキシドラジカルとの反応から生じる過酸化亜硝酸(パーオキシナイトライト)や、ミエロパーオキシダーゼ/亜硝酸イオン/過酸化水素、等によってグアノシンがニトロ化されて生成する修飾核酸である。これまでに、ウイルス感染1,2)、細菌感染3,4)、炎症性疾患5)、がん5)、喫煙6)、などでグアニンのニトロ化が亢進していることが明らかになり、酸化ストレスの新しいバイオマーカーとして注目されている。また最近では、シグナル伝達物質として知られているサイクリックGMP(cGMP)がニトロ化された8−ニトロcGMPの生体内での生成が同定され3)、活性酸素シグナルの新しいメディエーターとしての機能が示唆されている3,7-9)
 本抗体は、正常な核酸塩基は認識しないが、ニトロ化核酸に対しては、ニトログアノシンのみならずニトログアニン、ニトロキサンチンといったニトロ化塩基や、それらのヌクレオチドであるニトロcGMP、ニトロGMP, ニトロGTPなどに対して優れた反応性を示す。このため、本抗体は、グアニンの8位がニトロ化されたものを幅広く認識する、グアニンニトロ化のユニバーサルな抗体である。本抗体は、免疫組織染色法に加え、本抗体を樹脂へ固定化して、ニトログアニン誘導体のアフィニティー精製3,6)への利用も可能である。 
 本抗体は熊本大学医学部赤池孝章先生との共同開発によるものである。

1 mg/ml PBS溶液、防腐剤として0.1% ProClinを含む。
冷凍溶液、冷凍保存(解凍後は冷蔵保存)
 
   



 使用濃度
 ELISA(1 μg/ml)、免疫染色組織(10 μg/ml)


図1.モノクローナル抗体NO2G52の反応性
プレートに固相化したNO2-Guanosine結合BSAと各種の物質に対する、本抗体の反応を
競合法ELISAで検定したものである。本抗体が反応する物質は濃度に依存した右下がりの
曲線を与え抗体が反応していることを示している。
モノクローナル抗体は、8位がニトロ化されたものを幅広く認識し、正常なヌクレオシド
や核酸塩基には反応しない。抜群の特異性と高力価を有している。


      <無刺激>         LPS+INF-γ刺激   L-NMMA投与

図2. RAW264.7細胞(murine macrophage cell line)における内因性のグアニンのニトロ化
  蛍光標識したAnti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)にて検出。
(データ提供:熊本大学医学部 教授 赤池孝章先生)


よくあるご質問 
ニトログアノシン以外の酸化ストレスマーカー
何を調べることができるか
保存期間
 
参考文献
1) T. Akaike, S. Okamoto, T. Sawa, J. Yoshitake, F. Tamura, K. Ichimori, K. Miyazaki, K. Sasamoto and H. Maeda, "8-nitroguanosine formation in viral pneumonia and its implication for pathogenesis", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2003, 100, 685.
2) J. Yoshitake, T. Akaike, T. Akuta, F. Tamura, T. Ogura, H. Esumi and H. Maeda, "Nitric oxide as an endogenous mutagen for Sendai virus without antiviral activity", J. Virol., 2004, 78, 8709.
3) T. Sawa, M. H. Zaki, T. Okamoto, T. Akuta, Y. Tokutomi, S. Kim-Mitsuyama, H. Ihara, A. Kobayashi, M. Yamamoto, S. Fujii, H. Arimoto and T. Akaike, "Protein S-guanylation by the biological signal 8-nitroguanosine 3',5'-cyclic monophosphate", Nat. Chem. Biol., 2007, 3, 727.
4) M. H. Zaki, S. Fujii, T. Okamoto, S. Islam, S. Khan, K. A. Ahmed, T. Sawa and T. Akaike, "Cytoprotective function of heme oxygenase 1 induced by a nitrated cyclic nucleotide formed during murine salmonellosis", J. Immunol., 2009, 182, 3746.
5) Y. Terasaki, T. Akuta, M. Terasaki, T. Sawa, T. Mori, T. Okamoto, M. Ozaki, M. Takeya and T. Akaike, "Guanine nitration in idiopathic pulmonary fibrosis and its implication for carcinogenesis", Am. J. Respir. Crit. Care. Med., 2006, 174, 665.
6) T. Sawa, M. Tatemichi, T. Akaike, A. Barbin and H. Ohshima, " Analysis of urinary 8-nitroguanine, a marker of nitrative nucleic acid damage, by high-performance liquid chromatography-electrochemical detection coupled with immunoaffinity purification: association with cigarette smoking", Free Radic. Biol. Med., 2006, 40, 711.
7) M. Feelisch, "Nitrated cyclic GMP as a new cellular signal", Nat. Chem. Biol., 2007, 3, 687.
8) K. A. Ahmed, T. Sawa and T. Akaike, "Protein cysteine S-guanylation and electrophilic signal transduction by endogeneous nitro-nucleotides", Amino Acids, 2011, 41(1), 123.
9) T. Sawa, H. Arimoto and T. Akaike, "Regulation of redox signaling involving chemical conjugation of protein thiols by nitric oxide and electrophiles", Bioconjugate Chem., 2010, 21(7), 1121.
 
規格
(1) 性状:本品は、無色〜淡黄色微濁液体である。
(2) 力価: 試験適合
 
溶解例
ELISA(1μg/ml)、免疫組織染色(10μg/ml)
 
取扱注意
1.保存方法:冷凍
 
危険・有害性シンボルマーク(GHS表示)
 
 
備 考
 
 
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